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血液細(xì)胞分析儀解析血栓與止血實驗的發(fā)展動向
加入時間:2012-01-04 09:18:20  當(dāng)前新聞點擊率:6400

      近年來,隨著基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和實驗技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域也有新的突破醫(yī)療器械公司科研水平的不斷提高以及全自動血液細(xì)胞分析儀的創(chuàng)新。血栓與止血檢驗出現(xiàn)了許多新的研究熱點和新的發(fā)展趨勢。止血與血栓的研究涉及生物學(xué)、免疫學(xué)、生化學(xué)、病理生理學(xué)、藥理學(xué)、分子生物學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)多學(xué)科。因此,檢驗科應(yīng)積極開展血栓與止血實驗診斷工作,不斷深入進行基礎(chǔ)研究和臨床實踐,及時捕捉國內(nèi)外醫(yī)學(xué)發(fā)展前沿信息,不斷引進新方法、新技術(shù)、拓寬專業(yè)領(lǐng)域,對于提高檢驗醫(yī)學(xué)工作者的技術(shù)素質(zhì)和學(xué)術(shù)水平,促進檢驗醫(yī)學(xué)的學(xué)科建設(shè)與發(fā)展,將起到重要的推動作用。

        血栓的形成及調(diào)節(jié)主要與血管、血小板、凝血因子及血液流變有關(guān)。它們通過本身促凝或抗凝作用,組成了血液內(nèi)存在復(fù)雜、功能對立的凝血系統(tǒng)和抗凝系統(tǒng),而這兩個系統(tǒng)通過機體的生理調(diào)節(jié)又得保持著動態(tài)平衡,使得生理狀態(tài)下血液在血管中不斷地流動循環(huán),既不溢出于血管之外(出血),又不凝固于血管之中(血栓),一旦此種平衡遭到破壞,則可導(dǎo)致各種出血表現(xiàn)或血栓形成。止血與血栓試驗的目的就是通過各種因子的檢測從不同的側(cè)面、不同環(huán)節(jié)了解發(fā)病原因、病理過程,進行疾病的診斷和治療。迄今在醫(yī)院檢驗科用于臨床診斷的試驗大致分為兩部分,即篩選試驗和確診試驗。前者主要是常規(guī)中較簡易、快速、費用較低的試驗。根據(jù)檢測結(jié)果初步分析血栓的形成或出血原因。后者的目的是根據(jù)初篩的結(jié)果進一步分析病因和病理變化以確定診斷。這些試驗較特異、步驟繁鎖、費用亦高。目前國內(nèi)用于篩查的試驗有:出血時間(BT)、血小板計數(shù)(PLT)、血小板平均體積(MPV)、部分凝血酶時間(APTT)、凝血酶原時問(PT)、纖維蛋白原定量(Fg)、纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDPS)D一二聚體測定。用于診斷的試驗有:診斷血管病變:血管性假性血友病因子(vwF)、血漿內(nèi)皮素一1(ET1)、血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)等因子的檢測。用于血小板功能的估計:血小板聚集試驗(PAgT)、血小板粘附試驗(PAdT)、血小板少顆粒釋放蛋白(GMP140),血栓烷B2(抗凝)血因子分析:VIIIXaAT—III等因子活性及含量分析、凝血酶原標(biāo)志物。纖溶系統(tǒng)檢查:組織纖溶酶原激活物(e—PA)、纖溶酶原激活物抑制物(PA1)、纖溶酶原活性及纖溶酶一抗纖溶酶復(fù)合物等。近幾年先進儀器在檢驗醫(yī)學(xué)的應(yīng)用,使檢測方法進入了新階段,如利用流式細(xì)胞儀檢測血小板膜蛋白、血漿中各種抗凝血因子抗體,使用分子生物學(xué)技術(shù)進行遺傳病的診斷,甚至用激光共聚焦顯微鏡觀察不同病理過程,血小板中鈣離子濃度、鈣流及鈣波動,進一步研究止血與血栓疾病的病理生理及藥物作用機制,儀器昂貴及試劑的限制,這些方法還不能在各級醫(yī)院廣泛使用,目前更適合試驗室研究。

        止血與血栓這個邊緣學(xué)科令人矚目的進展使其實驗方法的研究在臨床工作中具有重大的使用價值,這些試驗主要用于:

        ①出血性疾病的診斷(如血友病、血小板病等)
        ②溶栓前狀態(tài)的要析。
        ③彌漫陛血管內(nèi)凝血(DIC)的實驗診斷。
        ④藥物治療的監(jiān)測(抗凝治療、溶栓治療、抗血小板治療及降纖治療)及手術(shù)前檢查。由于血栓形成是動態(tài)的,血栓形成時凝血與抗凝血之間相互調(diào)節(jié),同一實驗指標(biāo)在同一病人不同病程時其結(jié)果是不同的,比如DIC早期,PT縮短,纖維蛋白原含量增高,溶栓試驗(3P)陽性,而至病程后期,PT延長,纖維蛋白原減少,3P陰性。因些合理選擇試驗項目,正確分析實驗結(jié)果是非常重要的,應(yīng)該注意以下幾點:

        1、加強實驗室與臨床的信息交流,止血與血栓理論涉及醫(yī)學(xué)多學(xué)科,其方法日新月異,由于醫(yī)務(wù)人員知識的日益專一化,臨床醫(yī)生不可能對各項試驗都有深刻的了解,這就要求實驗室與臨床有經(jīng)常緊密的學(xué)術(shù)交流,信息溝通,不斷地向臨床介紹開設(shè)試驗的各方面資料,使臨床醫(yī)生對每項試驗原理、結(jié)果分析、臨床意義及其質(zhì)量控制有較深入的了解,而實驗室工作人員結(jié)合從醫(yī)生那里獲得的臨床診斷、治療方案、藥物劑量、病人生理、病理狀態(tài)及其它檢查結(jié)果,便于進行全血質(zhì)量控制,進一步評價自己實驗室的工作,總結(jié)經(jīng)驗和進行科研。
        2、血栓性疾病病理變化是動態(tài)的,診斷所選擇的實驗應(yīng)針對不同的病理環(huán)節(jié),根據(jù)病人臨床表現(xiàn)和病理情況合理選擇試驗,反之檢查結(jié)果需要結(jié)合臨床綜合分析及評價。
        3、目前診斷血栓實驗的參考值均有較大的生理波動范圍,個體之間的差異也較大,某些原發(fā)病也影響凝血指標(biāo),因而某些患者第一次檢查結(jié)果對群體來說在正常范圍,但對此患者來說已是異常值,所以有些實驗項目一次檢查結(jié)果不能輕率定論,動態(tài)觀察可能更早發(fā)現(xiàn)病情,這點對于DIC的早期診斷優(yōu)為重要。
        4、凝血試驗繁多,選擇項目時一定要注意先篩查,再有的放矢地選擇確診試驗,并力求簡單、快速、先易后難,切忌不顧病人醫(yī)療負(fù)擔(dān),無目的地大撒網(wǎng)檢查。

        質(zhì)量控制是保證實驗結(jié)果準(zhǔn)確的重要措施,由于凝血因子檢測可受多種因素干擾。所以加強血栓與止血試驗的分析前質(zhì)量控制和方法的標(biāo)準(zhǔn)化對血栓和止血試驗尤為重要,其內(nèi)容主要包括標(biāo)本的采取與保存、試劑的應(yīng)用、儀器的校正與監(jiān)控和實驗技術(shù)四個方面。總的來說,應(yīng)采取以下措施:

        ①標(biāo)本的采集:盡可能保證每次采血都在同樣的條件下進行。患者應(yīng)處于平靜和空腹?fàn)顟B(tài)。采血人員應(yīng)技術(shù)熟練一針見血,以防損傷組織致外源凝血因子進入試管,影響試驗結(jié)果。止血帶不應(yīng)扎得太緊,采血時間應(yīng)盡量短,采血后立即將血液與抗凝劑充分混勻,但不要用力振蕩,以免溶血。建議使用真空采血系統(tǒng),可顛倒混勻,確保血液和抗凝劑混合充分。
        ②標(biāo)本的運輸:用密封塑料管存放,最好在實驗室內(nèi)采血或盡快送至檢測地點,嚴(yán)防劇烈振蕩、日光直射和異物落入。有些檢測項目(B一血小板球蛋白、血小板因子等)需在4℃條件下運送標(biāo)本,以防止因子v的降解。
        ③標(biāo)本的處理:標(biāo)本應(yīng)盡快離心。一般在15%一20%離心,但纖溶試驗需在4℃左右離心,溶血的血漿會引起血小板活化和凝血時間縮短,應(yīng)棄之不用。血漿標(biāo)本原則上應(yīng)立即檢測,否則應(yīng)低溫保存。標(biāo)本的保存時間與保存溫度有關(guān),22%~24%保存2h2℃4℃保存4h,一20%保存2w,一70%保存6個月。
        ④血液標(biāo)本用01lmolL枸櫞酸鈉抗凝,應(yīng)注意血與抗凝劑的比例。對嚴(yán)重貧血或紅細(xì)胞壓積明顯增高的血液應(yīng)調(diào)整抗凝劑的用量。
        ⑤嚴(yán)格按照廠家的說明書儲存、使用產(chǎn)品。把反應(yīng)溫度控制在37% -4-l oC。檢查測定中試劑的PH和濃度,不要把血漿置于37℃條件下超過10min,凝血活酶或部分凝血活酶不應(yīng)超過廠家規(guī)定時問。
        ⑥合理設(shè)計試驗步驟,減少觀察誤差和時間趨勢。
        ⑦所有標(biāo)本均采取雙管測量,每天都應(yīng)做好質(zhì)控。
        ⑧每個項目都要建立奉實驗室參考值。
        ⑨根據(jù)檢查目的,選擇敏感試劑,實驗結(jié)果要用國際標(biāo)準(zhǔn)化報告方式。

        綜上所述,在高科技迅猛發(fā)展的今天,血栓與止血檢驗診斷的研究及發(fā)展趨勢,在血栓性疾病及相關(guān)疾病的診斷中發(fā)揮越來越重要的作用,我們還應(yīng)結(jié)合臨床實際不斷探索更靈敏、準(zhǔn)確、便捷和經(jīng)濟的診斷方法,不斷提高血栓與止血的實驗室診斷水平,使我國在這方面的學(xué)術(shù)水平提高到一個新階段。

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