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酶標(biāo)儀介紹及其檢測原理之一----光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大子780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因為植物吸收了光中的紅色光譜。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。

    檢測單位： 酶標(biāo)儀介紹及其檢測原理之一----光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光，400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大子780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因為植物吸收了光中的紅色光譜。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。

    光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。

    檢測單位用OD值表示，OD是opticaldelnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度，OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關(guān)系：

    E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度，Ι0為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。

    OD值由下述公式計算：

    E＝OD=C×D×E

    C為檢測物的濃度

    D為檢測物的厚度

    E為摩爾因子

    在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測，稱為測量波長。

    但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

    Anthos酶標(biāo)儀檢測值計算

    儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為0％，沒有檢測物的透光值為100％。則實際檢測中，檢測物的透光值均在0％一100％之間。透光值

    的計算如下：

    T＝（Meas—Min）／（Max—Min）

    其中T為透光值，Meas為檢測的二進(jìn)位數(shù)值，Min為在0％的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值，Max為在100％的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值，舉例如下：

    Anthos酶標(biāo)儀的中心定位

    儀器會自動對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時，儀器其實要進(jìn)行35個點的測量，選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。

    光源的參照通道

    參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。